Научный архив: статьи

Цель исследования – экспериментально обосновать возможность оптимизации стадии формоловой детоксикации безмикробного центрифугата штаммов Vibrio cholerae 569В и V. cholerae М-41 при производстве холерной химической вакцины. В качестве изменяемых факторов воздействия на процесс детоксикации были выбраны ее длительность и температура, при которой идет процесс. После окончания детоксикации проводили контроль специфической активности и специфической безопасности компонентов вакцины – холероген-анатоксина и О-антигенов. Показатели специфической активности (в реципрокных титрах) в дот-иммуноанализе составляли не менее 8 для холероген-анатоксина, 32 – для О-антигена Инаба, 160 – для О-антигена Огава, что соответствовало нормативной документации.

Исследование компонентов по показателю «Специфическая безопасность» выявило, что сокращение длительности детоксикации до 14 суток и увеличение температуры до 24 ± 2°C привело к неполной детоксикации безмикробного центрифугата штамма V. cholerae 569В.

Из полученных компонентов вакцины были выбраны наиболее активные и специфически безопасные образцы, из них была приготовлена экспериментальная таблеточная смесь, которая была проверена на соответствие промышленному регламенту на производство по показателям «Формальдегид», «Специфическая безопасность», «Аномальная токсичность», «Специфическая активность», «Иммуногенность». Результаты свидетельствуют о полном соответствии изученных свойств приготовленной смеси промышленному регламенту. Полученные данные свидетельствуют о возможности сокращения стадии детоксикации у штамма V. cholerae М-41 на 50% и V. cholerae 569В на 30% при повышении температуры до 37°C и 21°C соответственно.

Исследования, направленные на поиск перспективных для диагностики туляремии антигенных комплексов, совершенствование на их основе имеющихся и конструирование новых диагностических препаратов, не утрачивают своей актуальности. При этом большие надежды возлагаются на поверхностные структуры бактериальных клеток (липополисахарид, белки наружной мембраны) туляремийного микроба.

Целью нашего исследования явилось экспериментальное обоснование возможности применения комплексных антигенов внешних мембран и секретируемых стресс-белков туляремийного микроба для разработки тест-системы для определения специфических антител.

Результаты и обсуждение. Использование комплексных антигенов внешних мембран туляремийного микроба в иммуноферментном анализе (ИФА) позволяет выявлять специфические антитела у вакцинированных людей до 1,5 лет и лабораторных животных до 1,5 мес. после вакцинации (срок наблюдения). При этом в сыворотке вакцинированных людей обнаруживаются специфические антитела класса G и M. Применение комплексных антигенов в иммуноблоттинге может использоваться в качестве подтверждающего теста при скрининге сывороток в ИФА. Полученные стрессбелки обладают более низкой связывающей активностью в ИФА, но позволяют выявлять специфические антитела у вакцинированных лабораторных животных в более ранние сроки.

Заключение. В проведенной работе был изучен диагностический потенциал комплексных антигенов и секретируемых стресс-белков Francisella tularensis. Показана возможность использования комплексных антигенов внешних мембран туляремийного микроба для разработки экспериментальной тест-системы для детекции противотуляремийных антител. Секретируемые стресс-белки могут быть полезны при конструировании тест-систем для ранней диагностики туляремии.