Научный архив: статьи

Низин, продуцируемый Lactococcus lactis, в настоящее время является единственным бактериоцином, разрешенным и широко используемым в качестве пищевого консерванта (Е234). Для контроля коммерческих препаратов, присутствующих на российском рынке, актуальна разработка стандартизированной методики количественного определения низина с учетом современных международных требований. Биоанализ на основе луночной диффузии в агар представляет собой широко используемый метод определения низина, отличающийся чувствительностью, простотой и экономичностью. Цель исследования – оптимизация методики биоанализа для количественного определения низина А в сухих коммерческих препаратах и ее апробация на опытных образцах. Оптимизацию методики диффузии в агар проводили с тест-культурой Heyndrickxia coagulans по параметрам: бактериальная нагрузка, структурная модель питательного агара, чувствительность и время анализа. В результате обоснован алгоритм анализа, обеспечивающий высокую чувствительность, точность и воспроизводимость результатов в диапазоне от 0,5 до 10 МЕ/мл; общее время анализа сокращено до 24 ч, что позволяет использовать метод также в рутинных исследованиях в технологическом процессе. Апробацию методики проводили на образцах коммерческих препаратов низина различных производителей, длительно хранящихся при температуре от −18 до −20 °С. Показана возможность сохранения активности низина в коммерческих препаратах на уровне 90–100 %, в том числе в образцах российского производства со сроком хранения 20 лет. Тестирование стабильности низина при термической обработке показало, что во всех исследованных образцах низин сохранял активность в 0,02 н. растворах соляной кислоты (100 ± 9,7) % и полностью инактивировался при рН = 11. Оптимизированный алгоритм биоанализа с тест-культурой H. coagulans (штамм В-15356) может быть использован для количественного определения низина А, методика включена в проект новой редакции национального стандарта