ISSN 2500-1027

· Языки: ru / en

Статья: РАЗРАБОТКА И ПРИМЕНЕНИЕ ИММУНОМАГНИТНЫХ ЧАСТИЦ НА ОСНОВЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИИ СТАФИЛОКОККОВЫХ ЭНТЕРОТОКСИНОВ A И B В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ (2025)

Читать

Читать онлайн

Стафилококковые энтеротоксины A (SEB) и B (SEB), секретируемые коагулазоположительными бактериями Staphylococcus aureus, – известные этиологические агенты пищевых токсикоинфекций человека. При их детекции в пищевых продуктах важно устранять негативное влияние пищевой матрицы на специфичность и чувствительность используемой тест-системы. Целью данного исследования являлась разработка методики с использованием иммуномагнитной сепарации и иммуноферментного анализа для детекции стафилококковых энтеротоксинов в пищевых продуктах. Для решения поставленной задачи были получены моноклональные антитела, специфично взаимодействующие с SEA и SEB, на основе которых получены иммуномагнитные частицы для сепарации и концентрирования токсинов, разработана сэндвич-иммуноферментная тест-система для детекции токсинов. В результате удалось достигнуть ~80%-й извлекаемости энетротоксинов после искусственной контаминации пищевых образцов с пределом детекции 10 нг на 100 г образца продукта.

Ключевые фразы: стафилококковые энтеротоксины, staphylococcus aureus, моноклональные антитела, иммуномагнитная сепарация, иммуноферментный анализ

Автор (ы): Яковлева Вера Александровна (YAkovleva V. A.), Панферцев Евгений Александрович (Panfertsev E. A.), Решетняк Татьяна Викторовна (Reshetnyak T. V.), Перовская Ольга Николаевна (Perovskaya O. N.), Болтунова Анастасия Антоновна (Boltunova A. A.), Соловьёв Павел Владимирович (Solovev P. V.), Фёдоров Тарас Владимирович (Fedorov T. V.), Королёва-Ушакова Анжела Григорьевна (Koroleva-Ushakova A. G.), Бикетов Сергей Фёдорович (Biketov S. F.)

Журнал: БАКТЕРИОЛОГИЯ

Предпросмотр статьи

Идентификаторы и классификаторы

SCI: Биология
УДК: 57. Биологические науки

Для цитирования:

ЯКОВЛЕВА В. А., ПАНФЕРЦЕВ Е. А., РЕШЕТНЯК Т. В., ПЕРОВСКАЯ О. Н., БОЛТУНОВА А. А., СОЛОВЬЁВ П. В., ФЁДОРОВ Т. В., КОРОЛЁВА-УШАКОВА А. Г., БИКЕТОВ С. Ф. РАЗРАБОТКА И ПРИМЕНЕНИЕ ИММУНОМАГНИТНЫХ ЧАСТИЦ НА ОСНОВЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИИ СТАФИЛОКОККОВЫХ ЭНТЕРОТОКСИНОВ A И B В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ // БАКТЕРИОЛОГИЯ. 2025. № 4, ТОМ 10

Текстовый фрагмент статьи

Золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) – неспорообразующая неподвижная грамположительная коккобактерия. Относится к комменсальной микрофлоре человека, живущей на кожных покровах и слизистых. Является одним из самых распространенных патогенов. Патогенность S. aureus определяется способностью секретировать ряд белков, таких как металлопротеазы, α-гемолизин, стафилококковые энтеротоксины, токсин синдрома токсического шока, эксфолиативный токсин, лейкоцидин Пантона–Валентайна и некоторые другие белки. Энтеротоксины S. aureus (СЭТ) – широкая группа суперантигенов, обладающих высокой термостабильностью, приводящих к пищевым отравлениям с симптомами рвоты, болями в области кишечника, диареей, реже лихорадкой. В случае если популяция S. aureus достигает концентрации 104 КОЕ/мл(г) в продукте, она может продуцировать достаточное для отравления количество энтеротоксинов. Диапазон концентраций энтеротоксинов в пищевых продуктах, приводящих к развитию симптомов отравления, составляет 6–200 нг токсина на 1 г продукта в зависимости от его типа [1]. По оценкам, до 25% пищевых отравлений бактериальной природы ежегодно вызываются энтеротоксигенными S. aureus [2–4].

Будьте первым, кто начнет обсуждение

Если у вас возникли вопросы или появились предложения по содержанию статьи, пожалуйста, направляйте их в рамках данной темы.

Создать тему для обсуждения

Список литературы

1. Cieza MYR, Bonsaglia ECR, Rail VLM, Santos MVD, Silva NCC. Staphylococcal Enterotoxins: Description and Importance in Food. Pathogens. 2024 Aug 9;13(8):676. DOI: 10.3390/pathogens13080676
2. Feng X, Zhou D, Xie G, Xu H. Recombinase aided amplification combined with lectin-magnetic separation for detection of Staphylococcus aureus in food samples.International Dairy Journal. 2026;172:106437. DOI: 10.1016/j.idairyj.2025.106437
3. Hennekinne J-A. Staphylococcus aureus as a Leading Cause of Foodborne Outbreaks Worldwide. Staphylococcus aureus, Elsevier; 2018;129-46. DOI: 10.1016/B978-0-12-809671-0.00007-3
4. Hennekinne JA, De Buyser ML, Dragacci S. Staphylococcus aureus and its food poisoning toxins: characterization and outbreak investigation. FEMS Microbiol Rev. 2012 Jul;36(4):815-36. DOI: 10.1111/j.1574-6976.2011.00311.x
5. Kadariya J, Smith TC, Thapaliya D. Staphylococcus aureus and staphylococcal food-borne disease: an ongoing challenge in public health. Biomed Res Int. 2014;2014:827965. DOI: 10.1155/2014/827965
6. Lefebvre D, Blanco-Valle K, Hennekinne JA, Simon S, Fenaille F, Becher F, et al. Multiplex Detection of 24 Staphylococcal Enterotoxins in Culture Supernatant Using Liquid Chromatography Coupled to High-Resolution Mass Spectrometry. Toxins (Basel). 2022 Mar 31;14(4):249. DOI: 10.3390/toxins14040249
7. Wei X, Wang W, Wang T, Yang Y, Guo Y, Long L, et al. Detection of Staphylococcus Enterotoxin sea and seb in Milk Samples by Duplex Droplet Digital PCR. J Food Prot. 2025 Jul 21;88(8):100569. DOI: 10.1016/j.jfp.2025.100569
8. Mairi A, Ibrahim NA, Idres T, Touati A. A Comprehensive Review of Detection Methods for Staphylococcus aureus and Its Enterotoxins in Food: From Traditional to Emerging Technologies. Toxins (Basel). 2025 Jun 23;17(7):319. DOI: 10.3390/toxins17070319
9. Andjelkovic M, Tsilia V, Rajkovic A, De Cremer K, Van Loco J. Application of LC-MS/MS MRM to Determine Staphylococcal Enterotoxins (SEB and SEA) in Milk. Toxins (Basel). 2016 Apr 20;8(4):118. DOI: 10.3390/toxins8040118
10. Li Q, Dou L, Zhang Y, Luo L, Yang H, Wen K, et al. A comprehensive review on the detection of Staphylococcus aureus enterotoxins in food samples.Compr Rev Food Sci Food Saf. 2024 Jan;23(1):e13264. DOI: 10.1111/1541-4337.13264
11. Ford LP, Sutton SB, Mitchell DR, Bruno JG. Ultrasensitive Staphylococcal Enterotoxin B Quantum Dot-Based Lateral Flow Immunoassays for Rapid Testing of Poultry Rinsates and Milk. J Fluoresc. 2025 Aug 23. DOI: 10.1007/s10895-025-04526-1
12. Fujikawa H, Hirayama W. Solid-phase extraction of staphylococcal enterotoxin A in dairy products using an ion exchange resin. Food Control. 2017;73:720-5. DOI: 10.1016/j.foodcont.2016.09.024
13. Dester E, Alocilja E. Current Methods for Extraction and Concentration of Foodborne Bacteria with Glycan-Coated Magnetic Nanoparticles: A Review. Biosensors (Basel). 2022 Feb 11;12(2):112. DOI: 10.3390/bios12020112
14. Ветчинин СС, Шевяков АГ, Яковлева ВА, Миронова РИ, Бикетов СФ. Применение иммуномагнитной сепарации для ускоренного обнаружения клеток F. tularensis в образцах почвы с помощью иммунохроматографического теста. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2023;100(3):219-24. DOI: 10.36233/0372-9311-348
15. Wen Y, Tan Y, Zhao L, Lv X, Lin L, Liang D, et al. Rapid on-site detection of viable Escherichia coli O157: H7 in lettuce using immunomagnetic separation combined with PMAxx-LAMP and nucleic acid lateral flow strip. Microchemical Journal 2022;178:107348. DOI: 10.1016/j.microc.2022.107348
16. Jiang W, Ren Y, Han X, Xue J, Shan T, Chen Z, et al. Recombinase polymerase amplification-lateral flow (RPA-LF) assay combined with immunomagnetic separation for rapid visual detection of Vibrio parahaemolyticus in raw oysters. Anal Bioanal Chem. 2020 May;412(12):2903-2914. DOI: 10.1007/s00216-020-02532-9
17. Bai M, Wang Y, Zhang C, Wang Y, Wei J, Liao X, et al. Nanobody-based immunomagnetic separation platform for rapid isolation and detection of Salmonella enteritidis in food samples. Food Chem. 2023 Oct 30;424:136416. DOI: 10.1016/j.foodchem.2023.136416
18. Noh EB, Heo GB, Lee KN, Kang YM, An SH, Kim N, et al. Subtype specific virus enrichment with immunomagnetic separation method followed by NGS unravels the mixture of H5 and H9 avian influenza virus. J Virol Methods. 2023 Oct;320:114773. DOI: 10.1016/j.jviromet.2023.114773
19. Liu X, Guo Z, Qiao Y, Zhang S, Han W, Li X, et al. Detection of Staphylococcus aureus via IgY-based immunomagnetic separation and a phage lysin LysGH15-based colloidal gold immunochromatographic assay. J Adv Res. 2025 Nov;77:257-264. DOI: 10.1016/j.jare.2025.01.034
20. МУК 4.2.2429-08. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Метод определения стафилококковых энтеротоксинов в пищевых продуктах. 2008.
21. Nia Y, Lombard B, Gentil S, Neveux L, Mutel I, Guillier F, et al. Development and validation of the Standard method EN ISO 19020 - microbiology of the food chain - Horizontal method for the immunoenzymatic detection of staphylococcal enterotoxins in foodstuffs.Int J Food Microbiol. 2021 Sep 16;354:109319. DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2021.109319
22. Park CE, Akhtar M, Rayman MK. Nonspecific reactions of a commercial enzyme-linked immunosorbent assay kit (TECRA) for detection of staphylococcal enterotoxins in foods. Appl Environ Microbiol. 1992 Aug;58(8):2509-12. DOI: 10.1128/aem.58.8.2509-2512.1992
23. Westermeier R. Electrophoresis in practice: a guide to methods and applications of DNA and protein separations. Fifth edition. Weinheim, Germany: Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA; 2016.
24. Kurien BT, Scofield RH, editors. Protein Gel Detection and Imaging: Methods and Protocols. vol. 1853. New York, NY: Springer New York; 2018. DOI: 10.1007/9781-4939-8745-0
25. Ветчинин СС, Шевяков АГ, Федюкина ГН, Баранова ЕВ, Бикетов СФ. Получение гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к белку NS1 вируса Зика. Биоорганическая химия. 2019;45(2):173-83. DOI: 10.1134/S0132342319010196
26. Hermanson GT. Bioconjugate Techniques. 3rd ed. Elsevier; 2013. DOI: 10.1016/C2009-0-64240-9
27. Hnasko R, editor. ELISA: Methods and Protocols. vol. 1318. New York, NY: Springer New York; 2015. DOI: 10.1007/978-1-4939-2742-5
28. Crowther JR. The ELISA Guidebook. vol. 516. Totowa, NJ: Humana Press; 2009.

Выпуск

№ 4, Том 10 (2025)

Кол-во страниц: 160 страниц

Другие статьи выпуска

Детекция и типирование боррелий в Тульской области. Сообщение 2. Клещи, собранные в природных биотопах (2025)

Авторы: Козлова Т. В., Решетняк Т. В., Щит И. Ю., Бикетов С. Ф.

В данном исследовании проанализированы материалы сбора клещей лесного Ixodes ricinus, лугового Dermacentor reticulatus в природных биотопах Тульской области и их инфицированность возбудителями иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) за период с 2010 по 2020 г. Наибольшее количество клещей I. ricinus собрано в Алексинском, Ленинском и Суворовском районах, расположенных в лесной зоне области. Инфицированность клещей бактериями варьировала и по районам, и по годам в среднем от 5,38 до 36,95%. Всего исследовано на наличие возбудителей ИКБ 75,5% экземпляров клещей от общего количества, собранных в этот период (4736 из 6272 экземпляров). По результатам исследования собранных образцов I. ricinus ДНК бактерий рода Borrelia обнаружена в 754 пробах. Типировано 213 проб. В 188 (88,26%) пробах выявлена ДНК бактерий B. afzelii, в 25 пробах (11,74%) – ДНК бактерий B. garinii 20047Т. Доминирующий в области геновид B. afzelii преобладал в природных биотопах западной и центральной части лесной зоны (Белёвский, Суворовский, Ленинский районы). В северо-западной части лесной зоны (Алексинский район) и юго-восточной части лесостепной зоны (Ефремовский район) инфицированность клещей геновидами B. afzelii и B. garinii была одинаковой. В Венёвском районе инфицированных клещей не обнаружено.

При исследовании 3297 образцов клещей D. reticulatus ДНК бактерий рода Borrelia обнаружена в одной пробе в лесной зоне в Белёвском районе.

Полученные в ходе анализа данные подтверждают необходимость комплексного молекулярно-биологического мониторинга зараженности популяций клещей I. ricinus в природных очагах иксодовых клещевых боррелиозов Тульской области как определяющего фактора при расчете эпидемиологических рисков. Важно проводить информирование населения о рисках последствий присасывания клещей и мерах профилактики болезни Лайма (боррелиоза).

Сохранить в закладках

Определение уникальных пептидных маркеров изоформ ботулотоксина для их качественного и количественного определения методом масс-спектрометрии (2025)

Авторы: Сурин А. К., Рогозин М. М., Детушев К. В., Фирстова В. В.

Ботулинический токсин – это один из наиболее опасных биологических токсинов, применяемый в медицине, однако несущий потенциальную опасность в качестве агента биологической угрозы. В данном исследовании проведен комплексный in silico анализ аминокислотной последовательности ботулинического токсина разных серотипов с целью идентификации уникальных пептидных маркеров для специфической детекции методами масс-спектрометрии. Проведение биоинформатического анализа и теоретического протеолиза позволило идентифицировать уникальные пептиды, покрывающие различные функциональные домены ботулинических токсинов. Предложенные маркеры демонстрируют полную специфичность к целевым серотипам ботулотоксинов при анализе в базах данных UniProt и NCBI. Отобранные уникальные пептидные маркеры могут быть использованы при проведении анализа биологических образцов, продуктов питания или объектов окружающей среды на наличие ботулотоксинов методом жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии в режиме множественного мониторинга реакций или методом времяпролетной масс-спектрометрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией.

Сохранить в закладках

Метагеномный анализ клинических образцов, выделенных во время вспышки микоплазменной пневмонии в России в период с ноября 2023 г. по февраль 2024 г. (2025)

Авторы: Лебедева А. Ю., Фурсов М. В., Абаимова А. А., Кисличкина А. А., Сизова А. А., Волков Д. В., Фурсова Н. К., Храмов М. В., Дятлов И. А.

Инфекции нижних дыхательных путей являются одной из наиболее частых причин смерти в мире. Они могут быть ассоциированы с широким спектром бактериальных, вирусных или грибковых патогенов. Одним из актуальных возбудителей пневмонии является Mycoplasmoides pneumoniae.

Применение наряду с традиционными методами диагностики новых комплексных подходов к анализу клинических образцов, таких как метагеномные исследования, позволяет изучать совокупность патогенов, проводить их генотипирование, устанавливать наличие факторов вирулентности и резистентности.

В данной работе исследованы 464 клинических образца, полученных от пациентов с микоплазменной пневмонией во время вспышки на территории Российской Федерации в период с ноября 2023 г. по февраль 2024 г. Наличие возбудителя M. pneumoniae подтверждено во всех образцах методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. Большинство пациентов составляли дети (n = 449), медианный возраст – 12 лет, межквартильный размах – от 10 до 15 лет.

Метагеномный и филогенетический анализы позволили идентифицировать геновариант M. pneumoniae – сиквенстип ST3, относящийся к международному клональному комплексу CC1.

SNP-анализ собранных полных геномов изучаемых образцов M. pneumoniae не выявил мутаций a2063g и/или a2064g в последовательности гена 23S рРНК, наличие которых ассоциировано с устойчивостью патогена к макролидам. Таким образом, можно предположить, что микоплазмы, содержащиеся в образцах, чувствительны к макролидам.

Сохранить в закладках

Разработка лиофильно высушенной тест-системы на основе изотермической амплификации (LAMP) для диагностики малярии (2025)

Авторы: Панферцев Е. А., Решетняк Т. В., Фёдоров Т. В., Бикетов С. Ф.

В статье рассматривается комплекс исследований при создании лиофилизированной тест-системы для диагностики малярии на основе изотермической амплификации (LAMP). Малярия остается одним из наиболее распространенных и опасных заболеваний в мире, уносящим тысячи жизней. Традиционная диагностика (микроскопия, экспресс-тесты, полимеразная цепная реакция) надежна, но непрактична в регионах с ограниченными ресурсами для оказания медицинской помощи. Разработка лиофильно высушенных LAMP-тестов, стабильных при хранении и транспортировке без использования холодовой цепи, – перспективная альтернатива для быстрой и высокоэффективной диагностики малярийного плазмодия. Разработанная нами тест-система в лиофильно высушенном формате для выявления малярии поможет улучшить диагностику и лечение малярии, особенно в регионах с ограниченным доступом к медицинской помощи.

Сохранить в закладках

Издательство

Издательство: ГНЦ ПМБ
Регион: Россия, Москва
Почтовый адрес: «Квартал А», д. 24, п. Оболенск, г. о. Серпухов, Московская обл., 142279
Юр. адрес: «Квартал А», д. 24, п. Оболенск, г. о. Серпухов, Московская обл., 142279
ФИО: Дятлов Иван Алексеевич (ДИРЕКТОР)
Контактный телефон: +7 (___) _______
Сайт: https://obolensk.org/

Все права на тексты и товарные знаки принадлежат их законным владельцам. Подробнее...

Сайт https://scinetwork.ru (далее – сайт) работает по принципу агрегатора – собирает и структурирует информацию из публичных источников в сети Интернет, то есть передает полнотекстовую информацию о товарных знаках в том виде, в котором она содержится в открытом доступе.

Сайт и администрация сайта не используют отображаемые на сайте товарные знаки в коммерческих и рекламных целях, не декларируют своего участия в процессе их государственной регистрации, не заявляют о своих исключительных правах на товарные знаки, а также не гарантируют точность, полноту и достоверность информации.

Все права на товарные знаки принадлежат их законным владельцам!

Сайт носит исключительно информационный характер, и предоставляемые им сведения являются открытыми публичными данными.

Администрация сайта не несет ответственность за какие бы то ни было убытки, возникающие в результате доступа и использования сайта.

Спасибо, понятно.

Сказать «Спасибо»

Вы можете поблагодарить автора за публикацию. Ему (ей) будет приятно.

Наведите камеру на QR-код, чтобы открыть моб. версию страницы.