Публикации автора

Введение. Современный ареал хламидийной инфекции сельскохозяйственных и диких животных охватывает почти все континенты. В настоящее время для постановки первичного диагноза, проведения скрининговых исследований и отдельных этапов эпизоотологических обследований с целью выявления хламидионосителей в нашей стране применяют «Набор антигенов и сывороток для серологической диагностики хламидиозов сельскохозяйственных животных». При производстве средств диагностики важной задачей является обеспечение стабильности различных компонентов тест-систем в процессе их хранения и транспортировки. Одним из путей решения этой проблемы является стабилизация различных компонентов диагностических препаратов посредством лиофилизации.

Цель исследования. Отработка режима лиофилизации специфической хламидийной сыворотки, оценка ее соответствия характеристикам, заявленным в технических условиях на контроль тест-системы, и испытание стабильности этого компонента.

Материалы и методы. Сыворотку получали из крови овец, иммунизированных эмульсионным вакцинным препаратом штамма «АМК-16» Chlamydia psittaci. До проведения процедуры сублимации гипериммунные сыворотки замораживали до температуры минус 60 °С. Лиофилизацию сывороток проводили на аппарате Scientz 30F (Китай) двумя способами, различающимися температурными режимами и давлением в камере. Готовые препараты сывороток крови оценивали на соответствие техническим условиям диагностического набора. Полученные сублиматы закладывали на хранение на срок 24 мес. и исследовали в реакции связывания комплемента на протяжении этого периода.

Результаты. В ходе проведенных исследований было установлено, что наиболее эффективным оказался способ лиофилизации специфических сывороток, при котором процесс сублимации проходил при более низком давлении и наиболее высокой температуре нагрева. Оценка соответствия полученного препарата характеристикам, заявленным в технических условиях на тест-систему, показала, что качество сыворотки отвечало всем требованиям. Результаты изучения стабильности гипериммунной сыворотки продемонстрировали, что высушенный усовершенствованным способом препарат не теряет своей специфичности на протяжении 24 мес.

Заключение. В результате проведенной работы был отработан оптимальный режим лиофилизации специфической хламидийной сыворотки для диагностической тест-системы. Полученный препарат полностью соответствует характеристикам, заявленным в технических условиях на диагностикум. Установлено, что длительность хранения лиофилизированной сыворотки составляет не менее двух лет, в течение данного периода ее активность и физико-химические свойства не снижаются.

Инфекционные респираторные болезни крупного рогатого скота являются многофакторными заболеваниями, что в свою очередь обуславливает ассоциированную вирусную или вирусно-бактериальную этиологию течения инфекционного процесса среди различного поголовья продуктивных животных. Исходя из этого, борьба с респираторными ассоциированными инфекциями КРС является серьезной проблемой для животноводческой отрасли в подавляющем большинстве стран мира. Целью исследования явилось усовершенствование «Ассоциированной вакцины против ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 и хламидиоза крупного рогатого скота инактивированной эмульсионной» путем расширения антигенного спектра хламидийного антигена биопрепарата.

Стерильность вакцин оценивали согласно «ОФС 1.2.4.0003.15 Общая фармакопейная статья. Стерильность» (п.2.3) методом прямого посева. Безвредность биопрепаратов проводили в соответствие с ГОСТ 31926. Оценка переносимости вакцин проводилась в течение первых 10 суток после иммунизации. О переносимости вакцин судили по отсутствию местной и общей реакции животных на введение биопрепарата. Концентрация антител, специфичных к вирусу ПГ-3, определялась в реакции торможения гемагглютинации (РТГА). Специфические антитела к вирусам ИРТ и ВД-БС определялись в ИФА. Уровень противохламидийных антител в сыворотках крови иммунизированных животных определяли путем постановки реакции связывания комплемента (РСК). Иммуногенность вакцины определяли в остром опыте на белых мышах.

Проведенные исследования показали, что исследуемые вакцины стерильны и безвредны для лабораторных животных. Было установлено, что оба варианта ассоциированной вакцины хорошо переносятся лабораторными животными (кролики). Изменение состава хламидийного антигена ассоциированной вакцины не оказало негативного влияния на формирование противовирусного гуморального иммунитета у лабораторных животных. Уровень специфических противохламидийных антител у животных, иммунизированных усовершенствованной вакциной, был выше, чем в группе кроликов, привитых препаратом, изготовленным по стандартной методике. Индекс защиты в группе белых мышей, привитых усовершенствованным препаратом, был в 1,3 раза выше, по сравнению со стандартным образцом.

Проведенные исследования показали, что изменение композиции хламидийного антигена в составе «Ассоциированной вакцины против ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 и хламидиоза крупного рогатого скота» не оказывает негативного эффекта на формирование гуморального противовирусного иммунитета у лабораторных животных. Помимо этого, было доказано, что добавление двух штаммов хламидий в состав ассоциированной вакцины стимулирует выработку гуморального ответа в отношении хламидийного антигена, что способствует повышению иммуногенности вакцины в 1,3 раза.