Наблюдение за поведением одиночных молекул цитохрома P450 BM3 проводили с помощью двух наносенсоров — электрического нанопорового детектора (ЭНПД) и атомно-силового микроскопа (АСМ). ЭНПД на базе твердотельной нанопоры, сформированной в неорганической подложке на основе нитрида кремния, использовали для регистрации функциональной активности P450 BM3 в реакции гидроксилирования лаурата в присутствии NADPH. Функциональная активность исследованного фермента подтверждена методом спектрофотометрии (СФ). С помощью АСМ визуализировали динамику поведения молекул фермента на поверхности неорганической подложки. Полученные результаты наглядно демонстрируют перспективность использования нанотехнологических детекторов для определения физико-химических свойств ферментов на уровне единичных молекул с целью более глубокого понимания фундаментальных принципов функционирования ферментных систем.
В работе предложен способ металлизации частиц вируса табачной мозаики (ВТМ) с целью повышения четкости изображений, получаемых при их исследовании методом электронной микроскопии. Металлизация проводилась методом магнетронного напыления вольфрама с использованием аргоновой плазмы в разряде постоянного тока. Полученные с помощью электронной и атомно-силовой микроскопии значения диаметра частиц ВТМ хорошо согласуются с литературными данными. Предложенный способ может быть использован при исследовании других типов вирусных частиц методом электронной микроскопии.
Вирус табачной мозаики (ВТМ) использовали в качестве модельного объекта при раз-
работке метода модификации поверхности подложек из слюды, предназначенных для
исследования белок-содержащих частиц нанометрового размера методом атомно-
силовой микроскопии (АСМ). Модификацию поверхности осуществляли методом
магнетронного напыления золота в разряде постоянного тока в аргоне с использова-
нием хрома в качестве материала адгезионного слоя. Адсорбцию ВТМ проводили при
pH 7,4 на трех типах подложек: высокоориентированном пиролитическом графите
(ВОПГ), слюде, модифицированной 3-аминопропилтриэтоксисиланом (АПТЭС), и
слюде с золотым покрытием, сформированным методом магнетронного напыления.
ВОПГ использовали в качестве эталонной подложки. В случае слюды, покрытой зо-
лотом, количество связанных с поверхностью вирусных частиц было примерно в де-
сять раз больше, чем в случае слюды, модифицированной АПТЭС. Высота частиц
ВТМ на слюде, модифицированной АПТЭС, была ниже, чем на ВОПГ и на слюде, по-
крытой золотом. Предложенная методика может быть полезна при разработке био-
сенсорных устройств и при исследовании единичных частиц различных вирусов.