Архив статей

МОДИФИКАЦИЯ МЕТОДА КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ БИОПЛЕНКООБРАЗУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ САФРАНИНА (2025)
Выпуск: № 4, Том 264 (2025)
Авторы: Антоневский Игорь Викторович, Плешакова Валентина Ивановна, Лещёва Надежда Алексеевна

Реферат. Биопленки представляют собой организованные сообщества микроорганизмов. Существование в такой форме опосредует их повышенную устойчивость к антибиотикам, дезинфектантам, иммунной системе. Стандартный метод количественной оценки способности бактерий продуцировать биопленку, включающий определение оптической плотности биомассы в микротитровальном планшете, основан на окрашивании биопленки кристаллическим фиолетовым. Использование данного красителя имеет ряд ограничений, среди которых вариабельность экстракции и требования к технике безопасности. Цель исследования – модифицировать методику оценки биопленкообразующей способности микроорганизмов путем применения сафранина в качестве альтернативного индикаторного красителя и провести сравнительный анализ результатов с классическим методом. Исследование выполнено на клинических изолятах Escherichia coli (n=5) и Staphylococcus aureus (n=5), а также эталонных контрольных штаммах. Определение способности культур к биопленкообразованию проводили количественным методом определения этого показателя в микротитровальных планшетах. В рамках методики осуществляли параллельное сравнение получаемых показателей с использованием сафранина и классическим методом окрашивания кристаллическим фиолетовым, для этого каждый эксперимент выполняли в парных независимых планшетах. Окрашивание сафранином обеспечивало систематически более высокие значения оптической плотности (средний прирост составил 0,09; 10,2%), что было статистически значимо (t=5,16; p=0,00059). Между методами выявлена высокая положительная корреляция (r=0,96; p<0,001). В 90% случаев классификация степени адгезии оставалась согласованной, при этом сафранин продемонстрировал лучшую воспроизводимость для большинства штаммов. Полученные результаты подтверждают перспективность сафранина как альтернативного красителя для количественной оценки биопленок. Модифицированный метод может быть внедрен в рутинные лабораторные исследования после валидации и стандартизации, а также использоваться в скрининге антимикробных и антибиопленочных препаратов.

Сохранить в закладках