Статья: Методологический подход к оценке результатов лабораторного исследования с использованием однотипных по назначению иммуноферментных тест-систем, отличающихся показателями аналитической чувствительности и пределами измерений (на примере определения маркеров апоптоза и эндотелиальной дисфункции у детей с хроническими заболеваниями почек)

Введение. В практике выполнения ординарных и особенно научно-практических клинико-лабораторных исследований нередко встречаются ситуации, когда исследователь вынужденно прибегает к использованию однотипных по назначению лабораторно-диагностических тест-систем разных фирм-производителей, значительно различающихся показателями аналитической чувствительности и пределами измерений. Представленный методологический подход к статистическому анализу фактически измеренных концентраций маркеров апоптоза и эндотелиальной дисфункции в сыворотке крови и моче с использованием иммуноферментных (ИФА) тест-систем, различающихся показателями аналитической чувствительности и пределов измерений, позволяет нивелировать те недостатки, которые не могут не возникать в силу отличий в аналитических характеристиках, присущих тест-системам разных фирмпроизводителей. Обсуждается возможность применения этой методологии в качестве инструмента для математического преобразования фактически полученных результатов в пригодные для корректного статистического анализа.

Цель. Разработка методологии статистического анализа на основании полуколичественной оценки результатов измерений концентрации в сыворотке крови и моче гранзима Б, цитокератина-18, аннексина-V, интерлейкина-6, эндотелина-1, ICAM-1 однотипными по назначению наборами ИФА-реагентов разных фирм-производителей, отличающихся аналитической чувствительностью и пределами измерений.

Материалы и методы. Обследован 141 пациент с хроническими заболеваниями почек. Методами плашечного иммуноферментного анализа произведено определение содержания гранзима Б, цитокератина-18, аннексина-V, интерлейкина-6, эндотелина-1, ICAM-1 в сыворотке крови и моче с применением тест-систем разных фирмпроизводителей, различающихся пределами их аналитической чувствительности и диапазонами измерений. Учет реакции осуществлялся на фотометре универсальном Ф300 ТП (ОАО «Витязь», Беларусь), спектрометре Magellan V 7.1 (длина волны измерения 450 нм). Статистическая обработка полученного материала проводилась с применением стандартного пакета Statistica 10.0, программы Microsoft Excel. В дополнение к этому полученные результаты подвергались обработке с использованием разработанного метода статистического анализа.

Результаты. На первом этапе были определены концентрации маркеров апоптоза и эндотелиальной дисфункции в сыворотке крови и моче пациентов исследуемых групп и групп сравнения с использованием однотипных по назначению иммуноферментных тест-систем разных фирм-производителей, отличающихся показателями аналитической чувствительности и пределами измерений. Полученные значения содержания одного и того же биологически активного вещества различались между собой на порядок. Таким образом, установлено, что фактические измерения оказались несоизмеримыми и нуждаются в процедуре приведения их к сопоставимым величинам с тем, чтобы вся совокупность полученных результатов стала однородной. Для этого методом анализа смесей (mixture analysis) с использованием компьютерной программы PAST v 3.17 / PAIaeontological Statistics произведено выделение валидных наблюдений, распределенных в середине шкалы, исключая «нулевые» и малые значения, а также выбросы. На следующем этапе фактически полученные данные были приведены к соизмеримым величинам посредством нормировки показателей измеренной концентрации относительно пределов измерений, свойственных соответствующей тест-системе с выражением полученного значения в баллах, кратных 10: определяемое вещество, баллы = концентрация определяемого вещества, ед. изм. / предел измерений тест-системы, ед. изм. × 10.

Заключение. Предложенный методологический подход к оценке результатов лабораторного исследования обеспечивает достоверность статистического анализа фактически полученных данных в случае использования однотипных по назначению ИФА тест-систем, отличающихся аналитической чувствительностью реализуемых с их применением методов исследования и пределами измерений показателей концентрации соответствующего аналита.